幾種體細胞檢測方法的對比

作者：哈羅德 文章來源：哈羅德 發(fā)布于：2018-05-15 09:16:36 點擊量：

根據(jù)乳汁中體細胞數(shù)含量的多少來判斷是否患有隱性乳房炎，是一種比較可靠的方法，目前在臨床上應用的比例較高，常用的有乳汁體細胞直接計數(shù)法和間接計數(shù)法兩種。

直接計數(shù)法就是通過直接計算每毫升牛乳中細胞數(shù)量的方法來評價奶牛的乳房炎發(fā)病情況。

如直接顯微鏡計數(shù)法(DMSCC)，該方法檢測成本低，但因操作人員經(jīng)驗水平和所處環(huán)境條件的不同，導致數(shù)據(jù)結果誤差較大，且耗時長，不易掌握，不適合大批量快速檢測。

目前較先進的是采用熒光流式細胞技術(FCM)對牛奶中的體細胞進行熒光染色處理的自動計數(shù)法。優(yōu)點是快速、準確、誤差小、重復性好，電腦自動計數(shù)并打印結果，目前已經(jīng)有商業(yè)的儀器出售，該方法的缺點是需要專門的儀器設備，對于一些規(guī)模較小的養(yǎng)殖場(戶)會增加成本。此外，雖然各個國家對體細胞計數(shù)法比較重視，但是有關的規(guī)定和標準卻不盡相同，一般在200000~500000個／毫升以內(nèi)為安全。

現(xiàn)在國內(nèi)有很多顯微鏡與熒光技術相結合的產(chǎn)品，如DHC、牛博士等。優(yōu)點是操作簡單，缺點是需要耗材，且耗材較貴。

間接計數(shù)法比較著名的是加州乳房炎測試法(CMT)，其原理是將乳汁中的細胞破壞后，根據(jù)釋放出的DNA沉淀或凝塊的數(shù)量間接判斷細胞數(shù)目多少的方法。據(jù)此原理還衍生出了Wisonsin乳房炎測試法(WMT)、Michigan乳房炎測試法(MMT)、蘭州乳房炎測試法(LMT)等等改進方法。此外還有應用表面活性劑配方制成的SMT系列診斷液�？傮w來說，這一類方法操作簡單，診斷迅速，成本較低，但缺點是結果判定的主觀性較強，容易出現(xiàn)主觀誤差。

2微生物學檢測   對乳汁的病原微生物進行分離培養(yǎng)和鑒定，并與患牛的臨床癥狀和乳汁的性狀結合起來，判定乳房炎的發(fā)生情況。如在乳汁中分離到無乳鏈球菌、金黃葡萄球菌、大腸桿菌或霉形體時，就要注意這些病原可能與牛群的乳房炎發(fā)生有關系。但需要指出的是，有些隱性乳房炎不能在乳汁中檢出病原菌，而有些病原菌經(jīng)常存在于乳房內(nèi)，檢出時牛只不一定發(fā)病。因此根據(jù)乳汁中有無病原菌來判斷奶牛是否患有乳房炎需要綜合分析。

3乳汁理化性質(zhì)的檢測

3．1乳汁pH值檢查法

研究證實當發(fā)生乳房炎時，乳汁的PH值升高，升高的程度取決與炎癥的程度。因此通過檢測乳汁pH值的方法可以檢測乳房炎。常用的方法有溴麝香草酚藍試驗(BTB)法和乳房炎試紙法。

3．2乳汁導電性檢查法    當奶牛發(fā)生乳房炎是，其乳汁中的離子濃度升高，進而表現(xiàn)為導電性的增加，因此，通過檢測牛奶導電性的變化可以用于乳房炎的診斷。但不同的個體及不同的飼養(yǎng)管理狀況，乳汁電導率變化較大，因此判斷隱性乳房炎的關鍵是確定不同牛群正常乳汁的閾值。目前國內(nèi)外有很多基于這一原理的奶牛乳房炎電子診斷儀，實現(xiàn)對奶牛乳房炎及牛奶形狀的快速、綜合檢查。

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